在免疫层析试纸条中，样品垫是首个与样本接触的部件，其核心作用是承载样品、使其均匀分布，并高效释放待测物。样品垫的材质（常见如玻璃纤维素膜、滤纸、无纺布等）及其处理方式直接影响检测结果的准确性。

未经处理的玻璃纤维素膜（光玻纤）表面疏水，难以快速吸水，因此必须经过溶液处理。处理液中除缓冲盐、蛋白保护剂等外，表面活性剂 是至关重要的添加剂。由于结合垫和标记物复溶液不宜过多添加，样品垫便成为表面活性剂的主要“驻地”。

表面活性剂在样品垫中的核心作用

1. 增强亲水性，避免“T线反白”

• 现象：T线位置显色时出现白色空隙，导致线条不连续。
• 原因：T线包埋的蛋白（抗体/抗原）表面存在疏水区域，液体流过时难以润湿，造成液体绕行。
• 解决：表面活性剂可结合蛋白疏水部分，提升其亲水性，确保液体均匀流过并与标记物充分结合。若反白严重，可适当提高样品垫中表面活性剂浓度，或在划膜液中直接添加。

2. 防止“线条中空”

• 现象：C/T线中间出现空白区域，显色不均匀。
• 原因：亲水性不足或标记物颗粒大小不均、释放不匀。
• 优化方向：
• 提高划膜蛋白浓度；
• 在划膜液中添加表面活性剂、醇类或糖类；
• 调整样品垫中表面活性剂的种类与浓度，促进标记物再溶解；
• 优化标记工艺，控制颗粒尺寸均一性。

3. 减少背景残留，使背景干净

• 现象：NC膜上残留标记物颜色（如金标红色），背景泛红，干扰判读。
• 原因：膜疏水、颗粒堵塞、装配不当等，其中表面活性剂不足也会导致标记物无法与液体充分融合并顺利层析。
• 解决：适量添加表面活性剂可促进标记物与样本液融合，实现在疏水膜上的顺畅流动，从而获得干净的背景。

4. 改善“流路不匀（Stream现象）”

• 现象：层析过程中出现深浅不一的竖直条纹，而非均匀流体前沿。
• 可能原因：
• 表面活性剂浓度偏低；
• 黏度增强剂（如PVP）添加不足，影响标记物均匀释放；
• 结合垫材质结构不均一，导致标记物释放差异。
• 调整策略：平衡表面活性剂与PVP的用量，并筛选合适的结合垫材质。

如何选择表面活性剂？

• 首选非离子型：如 Tween-20、Tween-80、Triton X-100、Brij 35。
• 不带电荷，不影响抗原/抗体活性；
• 润湿性好，临界胶束浓度低；
• 不易引起溶血，适合全血检测。
• 慎用离子型：如SDS，可能引起蛋白变性、干扰免疫结合，且易溶血。
• 备选两性离子型：如 Tetronic 1307，对蛋白影响小，可作为替代选择。

常用添加浓度建议：0.5%～1%（视具体体系优化）。

搭档助剂：PVP（聚乙烯基吡咯烷酮）

样品垫处理液中常同步添加 PVP-K30（约0.5%），它能：

• 增强溶液黏度，调节流速；
• 通过氢键稳定蛋白与标记物；
• 促进颗粒分散与再溶解；
• 提升层析过程的均匀性。

通过科学选用表面活性剂（尤其是非离子型）并搭配PVP等辅助成分，可有效改善亲水性、避免显色异常、获得干净背景，从而提升检测的可靠性与判读准确性。工艺优化时，需根据具体标记体系、膜材与样本类型，进行表面活性剂种类、浓度与配方的系统性调试。