嘿，友友们！实验是不是又炸了（假阳/假阴）？明明按照方案来做，理论上是没有问题的，可报告结果却是频频“红灯”。是否忘记了一个好帮手——阻断剂！那么体外诊断常用的阻断剂其作用原理是什么？又是如何在体系中消除干扰的呢？且看本文详解!(建议收藏加关注）！

点击直达 阻断剂

新的项目开发，作为一名研发人员来说，免疫干扰问题一直是一个绕不开的话题，任何一个免疫检测方法都有可能受到外源或内源性干扰而出现假阳或假阴性的结果，其中内源性干扰往往是由于使用的样本中有非特异性干扰物质（如类风湿因子、异嗜性抗体、高脂/黄疸等）所导致的，消除干扰是产品研发中的重要任务之一。

据研究显示：超过10%的病人体内存在内源性的人异嗜性抗体，他能结合血清和血浆中其他物种的免疫球蛋白————美国病理学家学会（CAP）

据研究显示：10%到40%的病人的样本，可能会受到HAMA抗体的干扰————Larry Kricka，president，AACC

在夹心法免疫检测体系中至少使用两种抗体识别抗原的不同表位，正常情况下捕获抗体应与样本中的抗原所示浓度成正比，异嗜性抗体在结合抗原不存在的情况下连接两种抗体，造成结果假阳，或会连接二抗，造成结果假阴。

所以通常这时候就需要阻断剂来辅助我们的实验正常进行，确保数据的准确性。其阻断剂分为被动阻断剂和主动阻断剂，被动阻断剂通过物理占据或竞争结合非特异性位点，减少干扰物质与检测体系的非特异性结合。主动阻断剂通过特异性结合干扰物质，直接中和或封闭其活性位点，使其无法参与反应。并且阻断剂的添加对检测信号无不良影响，不降低样本本身信号值，用于各种IVD免疫/生化方法学。

在胶体金免疫层析法平台上，依双抗体夹心法举例，同等条件下，检测10份赋值阴性样本，考察其对部分假阳性样本的干扰消除效果：

1号：博梵生物

2号：J公司产品

3号：F公司产品

注：实验所用样本均为某知名名牌已赋值的血清样本；

实验结果：以上述对比实验结果可看出，竞品未能有效的使其样本消除干扰物质，检测线依旧出现条带；反观博梵生物阻断剂可有效阻挡干扰物质，检测线处未形成非特异性结合条带；

在荧光免疫层析平台上，依双抗体夹心法举例，同等条件下，检测50份PCT赋值样本，对比加与不加阻断剂对其最终结果准确性考察：

注：实验所用样本均为某知名名牌已赋值的血清样本；

实验结果：测试数份不同浓度的样本，以上述对比实验结果可看出，不加阻断剂出现了假阳性的现象，导致分析数据不准确性，反观添加了阻断剂的对比实验，则未出现假阳性现象，显示数据正常，且不影响其他样本的本身信号值；

在化学发光免疫平台上，依双抗体夹心法举例，同等条件下，检测50份PCT赋值样本，对比加与不加阻断剂对其最终结果一致性考察：

注：实验所用样本均为某知名名牌已赋值的血清样本；

实验结果：测试数份不同浓度的样本，以上述对比实验结果可看出，不加阻断剂出现了假阳性的现象，导致数据的不准确性，反观加了阻断剂的对比实验，则消除了样本中的干扰物质，其数据结果正常，且不影响其他样本的反应结果。